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蛋清溶菌酶的分离纯化

作者:小宝 2016-11-06 16:11:52

蛋清溶菌酶的分离和纯化,溶菌酶是糖苷水解酶分子量14000Da~15000Da,溶菌酶能水解N-乙酰葡萄糖胺与N-乙酰胞壁酸之间的β-1.4糖苷键,因此可以溶解革兰氏阳性菌的细胞壁而具有溶菌作用。溶菌酶的用途很多,它可以作为防腐剂应用在食品、饮料中,在医学上可以用作杀菌剂。   本研究比较了热处理法、离子交换法和超滤法从蛋清中提纯溶菌酶的效果,深入研究了适合批量生产溶菌酶的方法。实验结果表明,热处理法得到的溶菌酶的纯度和收率远低于离子交换法,且调pH值和热处理对溶菌酶的活性会有很大破坏,并造成了处理后的蛋清无法进行重复利用,大大降低了实际生产价值。采用离子交换法,用0.28mol/L氯化钠溶液可以将树脂吸附上的溶菌酶充分洗脱,最佳吸附条件为:常温,树脂和蛋清的体积比为1:6.18,蛋清pH值为6,稀释2倍,搅拌吸附80分钟,这时吸附到的溶菌酶的活性和收率是最好的,溶菌酶纯度可达到百分之百,最终得到的溶菌酶收率为86.6%,活性为20000U/mg。超滤法用30000道尔顿的膜来纯化溶菌酶,采用连续式方式将蛋清截留液稀释3倍效果较好,最后得到的溶菌酶纯度为100%,收率为73.1%,活性为18500U/mg。



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